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EZ Trans慢病毒包裝試劑盒

簡要描述:和元李記EZ Trans慢病毒包裝試劑盒(EZ Trans Lentiviral Packaging Kit)包含:慢病毒包裝質粒、對照質粒、轉染試劑(EZ Trans Regent)等三個組份。和元李記慢病毒包裝試劑盒,提供足量、優質的對照質粒和包裝質粒,省去實驗人員抽提質粒的工作。

  • 產品型號:AC04L505
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-04-18
  • 訪  問  量:620

詳細介紹

品牌其他品牌貨號AC04L505/AC04L510/AC04L520
供貨周期現貨應用領域環保,化工,生物產業,制藥,綜合

EZ Trans慢病毒包裝試劑盒

產品描述

和元李記EZ Trans慢病毒包裝試劑盒EZ Trans Lentiviral Packaging Kit)包含:慢病毒包裝質粒、對照質粒、轉染試劑(EZ Trans Regent)等三個組份。和元李記慢病毒包裝試劑盒,提供足量、優質的對照質粒和包裝質粒,省去實驗人員抽提質粒的工作。

和元李記慢病毒載體表達系統由pLenti慢病毒載體和Lentiviral Mix質粒組成。pLenti慢載體中含有HIV基本元件5LTR3LTR以及WPRE等其他輔助元件,表達框為U6-shRNA(NC)-CMV-EGFP-2A-Puro,含綠色熒光和puro真核抗性??蛻艨梢愿鶕煌膶嶒災康尼槍?span>plenti載體改造用于啟動子、基因功能功能研究,穩定株篩選等。Lentiviral Mix能夠表達病毒包裝需要的各種必需原件,可以兼容第二代和第三代的慢病毒包裝系統。

訂購信息

產品名稱

貨號

規格

EZ Trans  慢病毒包裝試劑盒

AC04L505

5T

EZ Trans  慢病毒包裝試劑盒

AC04L510

10T

EZ Trans  慢病毒包裝試劑盒

AC04L520

20T

產品組分

貨號

規格

 組分

 A對照質粒

B包裝質粒

C轉染試劑

AC04L505

5T

16μg

110μg

450μL

AC04L510

10T

32μg

220μg

900μL

AC04L520

20T

64μg

330μg

1800μL

運輸與保存

藍冰運輸。A、B組分-20℃保存,C組分4℃保存,有效期12個月。

使用方法

10 cm培養皿為例(1皿為1T

1.        細胞準備:293T細胞按照6×105cells/mL的細胞密度傳代到10cm培養皿中,第二天細胞長到80%-85%時準備轉染。

2.        轉染前換液:轉染前1h將需要轉染的細胞更換新鮮的DMEM,10mL/皿。

3.        轉染:

1)        1.5mL EP管記為質?;旌弦?span>(A),加入500uL DMEM,16μg質粒DNA(可自行改造)和22μg包裝質粒,振蕩混勻;

2)        另取1.5mL EP管記為轉染試劑混合液(管B),加入500uL DMEM,90μL 轉染試劑,振蕩混勻。

3)        再將管B緩慢加入到管A中,輕輕混勻,靜置8min形成復合物,后將混合液均勻滴加到提前換好液的10cm培養皿中,輕輕混勻,放入培養箱中培養

A

DMEM

500μL

DNA

16μg

包裝質粒

22μg

B

DMEM

500μL

轉染試劑

90μL

4.        轉染后換液:轉染后6-8h,將培養皿中的培養基吸掉,棄于廢液杯中,然后加入10mL 培養基(含有血清和抗生素)繼續培養。

5.        病毒收集:轉染48h后,吸取上清液于50mL 離心管中,4000rpm離心10min, 4,將上清液用0.45um過濾器過濾轉移到新的50mL 離心管中。此時上清液中的病毒顆??梢灾苯尤z測滴度或者感染目的細胞,如果對病毒的滴度及純度有較高要求,可進行后續操作。

6.        病毒濃縮(可選):每10mL 病毒上清液加入2.5mL EZ慢病毒濃縮液(CAT:AC04L442,混勻,4放置2h,4000rpm離心30min,吸棄上清。

7.        病毒分裝及保存(可選):吸取EZ慢病毒凍存液(CAT:AC04L4531mL重懸上述病毒濃縮沉淀,輕輕混勻后-80℃保存。病毒溶液可分裝保存,避免反復凍融。

注意事項

1.      本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。

2.      所有慢病毒操作均應盡量在BSL2*生物安全柜中進行,并佩戴一次性醫*口罩和手套。

3.      病毒切忌反復凍融,凍融一次病毒滴度降低10%-20%左右。

4.      病毒儲存6個月后,建議在使用前重新測定病毒滴度。

 

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